Сюжет запозичений із легенди грецького походження (VI ст.), згідно з якою св. Лука був першим, хто написав портрет Богоматері. На цій підставі художники вважали його своїм покровителем і в багатьох містах існувала гільдія художників, гільдія Св. Луки.
У картині Рогира ван дер Вейдена дія відбувається у відкритій лоджії. Зліва біля підніжжя трону сидить Мадонна, яка годує грудьми немовля Христа. Трон, що нагадує про її майбутньої ролі Цариці Небесної, прикрашений скульптурними фігурками Адама і Єви, що має нагадати про первородний гріх, який спокутували Христос і Марія.
Навпаки Мадонни, шанобливо схиливши коліна, запам’ятовує її вигляд св. Лука. Художник зумів показати внутрішній стан людини, пов’язаний з конкретною ситуацією: трепетне благоговіння і зосередженість художника в момент творчого процесу. За спиною св. Луки через прочинені двері видно бик і книга – його традиційні атрибути як одного з авторів Четвероєвангелії. Тут багато що типово для улюблених нидерландцами композицій: хоча б далевая панорама міста і каналу, написана так дрібно, ніжно і ретельно, з двома задумливими людськими фігурками на мосту.
Але саме чудове – обличчя і руки Луки, пише мадонну “з натури”. У нього особливе вираз – дбайливо і трепетно внемлющее вислів людини, який весь поринув у споглядання. Так дивилися на натуру старі нідерландські майстри. Деякі вчені припускають, що особа Луки – автопортрет художника. Є кілька версій цієї малярства в музеях Бостона і Мюнхена.