Живопис, замовлена імператором Карлом V, була виконана в Аугсбурзі у 1548 році. Ізабелла Португальська вийшла заміж за імператора Карла V в 1526 році. Вона померла дуже молода, коли їй було лише 36 років, і задовго до того, як Карл V уповноважив Тиціана написати її портрет. Її бліде обличчя підкреслює її м’якість, яка також видима в тонких пальцях рук.
Весь портрет зосереджений навколо чудової кольорової гармонії червоного, білого і золотого. Чарівний кольоровий контраст забезпечений синіми і зеленими відтінками пейзажу.