Портрети Йоганнеса Куспиниана і його дружини Лукас Кранах Старший написав у 1503-1504 р. р. Тоді молодий художник жив у Відні. В той період це був центр гуманістичної культури, там жили і працювали відомі вчені, знавці античності, медики, математики, історики, літератори. Тут Кранах познайомився з гуманістами і створив ряд чудових портретів. Портрети медика та історіографа 29-річного доктора Йоганна Куспиниана і його 16-річної дружини Анни по праву вважаються одними з кращих у старої німецької живопису.
Художник створив яскраві образи людей ренесансної епохи. Молодий гуманіст зображений з книгою в руках на тлі типово німецького пейзажу з замком і церквою на горі. Спрямований вдалину досліджує погляд дає відчути характерні риси нового покоління німецьких учених. У молодої дружини зосереджений погляд, навіть трохи суворий. Очевидно художник таким чином показав її пошуки і роздуми.